自1935 年 Quick 創(chuàng)建凝血酶原時(shí)間（prothrombin time，PT）測(cè)定方法以來，迄今仍然是檢測(cè)外源凝血系統(tǒng)諸因子及相關(guān)物的重要篩選試驗(yàn)，PT也是目前口服抗凝劑的主要手段。但是，PT測(cè)定受多種因素影響，必須對(duì)它進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制，以提高PT檢測(cè)的精密度、準(zhǔn)確度和可靠性。

1.組織凝血活酶標(biāo)準(zhǔn)化：應(yīng)用的國際參考品（international reference preparation IRP），有下列幾種：

（1）單一組織凝血活酶國際參考品：是一種組織提取物的生理鹽水懸液制劑。WHO在英國使用的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的“英國比較凝血活酶”（British comparative thromboplastin,BCT）為基礎(chǔ)制備WHO的原級(jí)凝血活酶參考品（primary reference preparation），如人腦組織凝血活酶，編號(hào)67/40。同時(shí)又以BCT67/40為基礎(chǔ)標(biāo)化了次級(jí)參考品（secondary reference preparation）如牛腦組織凝血活酶，編號(hào)為68/434；兔腦為70/178。后來WHO還公布了一些次級(jí)組織凝血活酶參考品，如人腦或胎盤制劑，如BCT/253；兔或兔、猴組織混合制劑，如RBT/79 等。

（2）復(fù)合組織凝血活酶國際參考品：它是組織提取物的生理鹽水懸液中加入適量的纖維蛋白原、因子V和氯化鈣組成的制劑，如牛組織凝血活酶OBT/79等。目前世界各國都廣泛應(yīng)用WHO的這些參考品來校正本國或本地區(qū)制備或生產(chǎn)的組織凝血活酶參考物。這樣使世界范圍內(nèi)有了多種組織凝血活酶參考品。

2.組織凝血活酶工作制劑（working preparation,WP）的國際敏感度指數(shù)

（international sensitivity index,ISI）：

由于不同組織凝血活酶對(duì)凝血因子的敏感性不同。為了使不同敏感性的組織凝血活酶在檢測(cè)PT中能得到同樣的結(jié)果，必須要制定一個(gè)共同的敏感性指標(biāo)。這就需要通過自制的試劑與國際參考品（IRP）進(jìn)行比較，然后得出一個(gè)校正值。具體的方法如下：

（1）用國際參考品（IRP）標(biāo)定國家、地區(qū)或本實(shí)驗(yàn)室的參考制劑（reference preparation,RP）。

（2）用實(shí)驗(yàn)室參考制劑（RP）標(biāo)定工作制劑（WP）。

1）標(biāo)本：2 份正常人血漿和 6 份口服抗凝劑達(dá) 6 周的患者血漿，連收 10 天，共 60 份標(biāo)本。

2）測(cè)定：按一定順序進(jìn)行測(cè)定，每份標(biāo)本重復(fù)測(cè)定2次。將PT測(cè)定的結(jié)果（秒）點(diǎn)在雙 對(duì) 數(shù)坐標(biāo)紙上，橫坐標(biāo)WP的PT測(cè)定結(jié)果，縱坐標(biāo)RP的PT測(cè)定結(jié)果，畫出較好 的各點(diǎn)擬合直線，得出定標(biāo)曲線，通過 WP/RP 比值，或回歸方程求出斜率 b。

3）計(jì)算WP的ISI值：

ISI值愈接近于1.0，表明組織凝血活酶試劑愈敏感，因此，生產(chǎn)和出售組織凝血活酶試劑的廠商，必須在產(chǎn)品上標(biāo)有 ISI。

3.PT 測(cè)定結(jié)果的報(bào)告方式：

理論上，無論何種組織凝血活酶，只要標(biāo)有ISI值，就可與國際參考制品進(jìn)行對(duì)比校正，并可用同一種計(jì)量單位報(bào)告。1985 年 ICSH 和 ICTH 推薦以 PT 監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的報(bào)告方式是國際正常化比率（international normalizde ratio,INR）。INR 的計(jì)算公式如下：

在用 INR 后，各種敏感性不同的組織凝血活酶均可得到相同的 INR 值。

4.儀器特有 ISI：

上述 PT 根據(jù)報(bào)告方式適用于手工法（試管傾斜法）測(cè)定PT。但是手工法與儀器法以及儀器法與儀器法測(cè) 定PT的INR之間仍有差異。研究表明，在 不同三臺(tái)自動(dòng)化儀器上，使用同一種ISI為1.12的 Thromborel S 試劑，測(cè)定PT的均值分別為10.7秒、12.1秒和 11.1秒。但若以同一ISI值計(jì)算INR，得出的數(shù)值也存在著不同程度的差異。為此，提出建議：同一組織凝血活酶試劑用于不同儀器時(shí)，可用所謂的“儀器特有的ISI”（instrument specific ISIs）或稱區(qū)域性 ISI（Local ISI）來計(jì)算 INR。

每臺(tái)儀器所使用的凝血活酶試劑都應(yīng)該有特定的ISI值，重新標(biāo)定ISI值的做法是購買標(biāo)有INR的凍干血漿，然后在自己的儀器上再標(biāo)定所使用凝血活酶試劑的ISI值，這樣才可使病人的INR具有可比性。

參考值

因儀器/試劑不同，會(huì)得出不同結(jié)果，故很難統(tǒng)一規(guī)定參考值。各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自己的儀器試劑等條件，自行測(cè)定一批健康人，建立參考值。此后至少每年或當(dāng)條件有變化時(shí)，根據(jù)新的條件，重新建立。參考值 PT 測(cè)定的一切條件均應(yīng)與患者血漿 PT 測(cè)定相同（包括采血、容器、抗凝劑等）。健康供血者應(yīng)選至少20個(gè)18～55歲的男性和非妊娠、月經(jīng)期女性，不 可服藥，在平靜休息狀態(tài)采血、以減少個(gè)體差異（有條件時(shí)，可測(cè)一批老年人和小兒，分開統(tǒng)計(jì)）。同時(shí)應(yīng)分開幾天采血和測(cè)定，以減少天間差異。測(cè)定結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn) 差：以兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差（2SD）或 95%可信限作為參考范圍。對(duì)于三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差是正常還是異常，需結(jié)合具體情況進(jìn)行評(píng)估。從統(tǒng)計(jì)學(xué)上講，其中有些人是正常的。用以上標(biāo)準(zhǔn)，病人（PT異常）則很少會(huì)遺漏。